-
-
技術(shù)原理
（1）啟動(dòng)子是結(jié)構(gòu)基因上游的轉(zhuǎn)錄起始及基因調(diào)控區(qū)域，有很多的順式作用元件，結(jié)合相應(yīng)的反式作用因子來(lái)調(diào)控結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄?；蚓哂袝r(shí)空表達(dá)特異性，研究基因的表達(dá)特異性需要啟動(dòng)子與報(bào)告基因結(jié)合，通過(guò)報(bào)告基因轉(zhuǎn)錄水平的觀察和測(cè)量來(lái)反映啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄活性和特異性，間接的反映出基因的時(shí)空表達(dá)特異性。常用的報(bào)告基因有β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS) 熒光蛋白，熒光素酶(Luc) 等。
（2）通過(guò)構(gòu)建所需要研究的啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因(GUS、GFP)的表達(dá),進(jìn)而通過(guò) GUS 染色或 GFP 熒光檢測(cè)，判斷啟動(dòng)子表達(dá)強(qiáng)弱和組織特異性。另外，通過(guò)構(gòu)建不同的截短啟動(dòng)子片段驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因的表達(dá)，以反映出啟動(dòng)子上的順式作用元件對(duì)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的影響。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)
（1）具有多種報(bào)告基因,可針對(duì)不同目的選擇報(bào)告基因；
（2）可以針對(duì)客戶設(shè)計(jì)的啟動(dòng)子或報(bào)告基因定制化的設(shè)計(jì)載體；
（3）載體構(gòu)建速度快、效率高。
客戶提交實(shí)驗(yàn)詳細(xì)信息(啟動(dòng)子序列，參考基因組等)——對(duì)客戶提交信息和材料的確認(rèn)——設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增目標(biāo)序列——重組于啟動(dòng)子分析載體上——Sanger測(cè)序確認(rèn)陽(yáng)性克隆——撰寫提交——實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
（1）提供啟動(dòng)子分析載體圖譜,序列信息及詳細(xì)的構(gòu)建過(guò)程；
（2）提供載體的酶切圖譜和測(cè)序結(jié)果。
-
鄂公網(wǎng)安備42018502008046號(hào)